启达清®柴银颗粒（口服液）由银翘散和柴葛解肌汤加减而得，组方含有柴胡、金银花、黄芩、葛根、荆芥、青蒿、连翘、桔梗、苦杏仁、薄荷、鱼腥草等透邪清热的11味中药制备而成，具有清热解毒、利咽止咳的功效；用于治疗上呼吸道感染引起的流行性感冒等疾病。
前期研究发现柴银颗粒对单纯α属的人类冠状病毒229E（HCoV-229E）感染体内外模型均有较好的疗效，可显著降低模型组病毒核酸的表达量。近期通过研究发现，启达清®柴银颗粒对人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺小鼠病证结合模型具有较好的治疗作用。
实验目的
基于具有清热解毒功效的启达清®柴银颗粒，建立与其治疗证型相符的中医证候动物模型，以此来评价启达清®柴银颗粒对人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺小鼠病证结合模型的疗效和对模型的治疗机制。
实验方法
除正常对照组和229E感染组外，其余小鼠每天持续置于（95±5）%相对湿度，无风，温度（37±2）℃的人工气候箱中，4h刺激后取出，连续7d。除正常对照组和湿热对照组外，其余小鼠于湿热刺激第5天，用乙醚轻度麻醉后，以100 TCID50 HCoV-229E病毒液滴鼻感染，50μL/只。感染当天开始灌胃给药，0.2mL/10g，每日1次，连续3d，正常对照组、湿热对照组、229E感染组、模型对照组在同等情况下给予生理盐水。
实验指标
肺组织核酸检测，下丘脑PGE2、cAMP及肺组织IL-1β、CD14、MDA、SOD，外周血T淋巴细胞亚群及B淋巴细胞比例。
实验结果
◆小鼠一般状态观察
正常对照组小鼠体重正常，摄食及饮水正常，活动灵敏，皮毛光泽顺滑，二便正常；模型对照组小鼠体质量减轻，摄食和饮水减少，嗜卧懒动甚则精神萎靡，毛色潮湿，扎堆少动，反应迟缓，食欲不振，纳呆，大便先期粘腻后期干结；柴银颗粒高、中、低剂量组小鼠上述症状明显改善。
◆小鼠肺指数及肺指数抑制率
与正常对照组比较，模型对照组小鼠肺指数显著增加（P＜0.01）；与模型对照组比较，柴银颗粒高、中剂量组小鼠肺指数有所降低，差异无统计学意义（P＜0.05），肺指数抑制率分别为26.49%、21.06%。
图1 柴银颗粒对模型小鼠-肺指数的影响(n=10）
◆小鼠肺组织病毒载量
正常对照组小鼠肺组织中无HCoV-229E核酸表达；229E感染组及模型对照组小鼠肺组织中有明显的核酸表达（P＜0.01）；与模型对照组比较，柴银颗粒高剂量组可显著降低小鼠肺组织中病毒核酸表达量（P＜0.05）。
图2 柴银颗粒对人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺小鼠病证结合模型肺组织病毒载量的影响（n=6）
◆药物对小鼠下丘脑PGE2、cAMP的因子含量的影响
与正常对照组比较，模型对照组小鼠下丘脑中PGE2、cAMP含量显著增高（P＜0.01）；与模型对照组比较，柴银颗粒3个剂量组可显著降低小鼠下丘脑PGE2及cAMP的含量（P＜0.05，P＜0.01）。
图3 柴银颗粒对人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺小鼠病证结合模型下丘脑PGE2、cAMP的因子含量的影响（n=6）
◆药物对小鼠肺组织炎性因子IL-1β、CD14、MDA、SOD的因子含量的影响
与正常对照组比较，模型对照组小鼠肺组织中IL-1B、CD14、MDA含量显著增高、SOD显著降低（P＜0.01）；与模型对照组比较，柴银颗粒3个剂量组可显著降低小鼠肺组织CD14、MDA、IL-1型含量、显著升高小鼠肺组织SOD含量（P＜0.05，P＜0.01）。
图4 柴银颗粒对人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺小鼠病证结合模型肺组织炎性因子含量的影响（n=6）
◆药物对小鼠外周血免疫细胞比例的影响
与正常对照组比较，模型对照组小鼠外周血CD4+T/CD8+T细胞的比值显著降低（P＜0.01）；与模型对照组比较，柴银颗粒低剂量组可明显升高CD4+T/CD8+T比值（P＜0.05）。
图5 柴银颗粒对人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺小鼠病证结合模型外周血免疫细胞比例的影响（n=6）
实验讨论
研究采用具有辛凉透表，清热解毒功效的柴银颗粒对人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺小鼠病证结合模型进行全面的药效评价。研究发现，给予柴银颗粒治疗后模型小鼠体质量减轻，摄食量和饮水量减少，嗜卧懒动甚则精神萎靡，毛色潮湿，扎堆少动，反应迟缓，食欲不振，纳呆，大便先期粘腻后期干结等符合中医湿热证的临床表现明显改善；模型小鼠肺组织中IL-1β、下丘脑中PGE2、cAMP含量与正常对照组比较显著下降。
本研究结果与前期药理研究发现的启达清®柴银颗粒具有退热及抗炎等方面的作用相一致。
实验结论
通过降低模型小鼠肺指数、降低小鼠肺组织病毒核酸表达量、抑制免疫炎性因子表达，调节下丘脑体温调节中枢因子表达及外周血淋巴细胞免疫功能等方面对模型进行治疗，启达清®柴银颗粒对人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺小鼠病证结合模型具有显著的治疗作用，研究结果为临床用药提供了客观的试验数据支持。
参考文献：
赵荣华,郭姗姗,耿子涵,孙静,时宇静,包蕾,鲍岩岩,高英杰,张贵民,关永霞,崔晓兰,王道涵.柴银颗粒对人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺小鼠病证结合模型治疗及作用机制研究[J].中国药物警戒,2021,18(12):1123-1128+1154.
